Screening of cytotoxic, anti-angiogenic, anti-tumorogenic and antimicrobial activities of Anatolian Vipera ammodytes (Nose-horned viper) venom

Abstract

Objective: In the present study, we aimed to screen the cytotoxic, antimicrobial, anti-angiogenic and anti-tumorogenic activities of Anatolian Vipera ammodytes (Nose-horned Viper) crude venom. Material and methods: The cytotoxicity was screened against PC3, HeLa, CaCo-2, U-87MG, MCF-7 and Vero cells by using MTT assay. The antimicrobial activity on Escherichia coli ATCC 25922, E. coli 0157: H7, Enterococcus faecalis 29212, Enterococcus faecium DSM 13590, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Salmonella typhimirium CCM 5445, Proteus vulgaris ATCC 6957, Bacillus cereus ATCC 7064 and Candida albicans ATCC 10239 was assayed by determining the minimum inhibitory concentration using the broth dilution method. Anti-angiogenic and anti-tumorogenic activity was assessed by using chick chorioallantoic membrane (CAM) assay. Results: The IC50 value of V. ammodytes venom on cultured cells varied from 1.8 to 7.0 mu g/mL after 48 h treatment. Venom showed antimicrobial activity on P. vulgaris, S. aureus, S. epidermidis, E. faecium and C. albicans (the highest activity). The venom exhibited dose-dependent anti-angiogenic activity on CAM model at 2 and 10 mu g/mL doses with scores of 1.1 and 2.0, respectively. Conclusion: The results of the present study contributed to the knowledge of the biological activities of Anatolian V. ammodytes venom and showed its potential for further bioactivity guided characterization studies.

Amaç: Bu çalışmada, Vipera ammodytes (Burunlu Engerek) ham zehrinin sitotoksik, antimikrobiyal, anti-anjiyojenik ve anti-tümör aktivitelerinin taranmasını amaçlanmıştır. Metod: PC3, HeLa, CaCo-2, U-87MG ve MCF-7 kanser hücre hatları ve bir normal hücre hattı (Vero) kullanılarak MTT testi ile sitotoksite taraması yapılmıştır. Antimikrobiyal aktivite broth seyreltme metodu kullanılarak hesaplanan minimum inhibitör konsantrasyon ile değerlendirilmiştir. Escherichia coli ATCC 25922, E. coli 0157:H7, Enterococcus faecalis 29212, Enterococcus faecium DSM 13590, Staphy- lococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Salmonella typhimirium CCM 5445, Proteus vulgaris ATCC 6957, Bacillus cereus ATCC 7064 ve Candida albicans ATCC 10239 türleri kullanılmıştır. Anti-anjiyoge- nik anti-tümör aktivite civciv koryoallantoik membran (CAM) modeli ile değerlendirilmiştir. Bulgular: V. ammodytes zehrinin 48 saat sonunda hüc- reler üzerindeki IC 50 değeri, 1.8 ve 7.0 μg/mL arasında değişmiştir. Zehir P. vulgaris, S. aureus, S. epidermidis ve C. albicans (en yüksek etki) üzerinde antimikrobiyal etki göstermiştir. CAM deney modelinde 2 ve 10 μg/mL zehir dozlarında (sırasıyla 1.1 ve 2.0 skorları ile) anjiyogenezde doza bağlı baskılanma görülmüştür. Sonuç: Bu çalışmanın sonuçları Anadolu'da bulunan V. ammodytes zehrinin sahip olduğu biyolojik aktiviteleri ortaya koymuş ve ileride yapılacak biyoaktivite rehberli karakterizasyon çalışmaları için sahip olduğu potansiyeli göstermiştir.